Dunne laag chromatografie
Dunnelaagchromatografie (of TLC) is een methode waarbij mengsels worden gescheiden in hun afzonderlijke componenten.
TLC wordt uitgevoerd op een TLC-plaatje. Deze platen bestaan uit een laag silica en worden gewoonlijk ondersteund door een dun stuk glas, hoewel ook andere materialen zoals plastic kunnen worden gebruikt. De silicagelaag op de voorkant van de TLC-plaat wordt de stationaire fase genoemd.
Het uitvoeren van TLC
Het uitvoeren van een TLC-experiment begint met het plaatsen van een kleine druppel vloeibare analyt op de bodem van het TLC-plaatje. Dit wordt "spotten" van het TLC-plaatje genoemd. Zeer dunne glazen buisjes worden gewoonlijk als spotters gebruikt.
Zodra een plaat is gespot, wordt hij in een glazen recipiënt geplaatst met een kleine hoeveelheid oplosmiddel. Dit oplosmiddel wordt de mobiele fase genoemd. Het is belangrijk dat de hoogte van het oplosmiddel lager is dan de hoogte waarop de verbinding op de plaat is gespot. Als het oplosmiddel door capillaire werking langs de TLC-plaat omhoog beweegt, beweegt de verbinding ook mee. De verbinding wordt gescheiden in haar componenten op basis van de aantrekkingskracht van elke component op de stationaire fase versus de mobiele fase. Componenten die meer worden aangetrokken door de mobiele fase dan door de stationaire fase, zullen verder omhoog bewegen. De aantrekkingskrachten zijn gebaseerd op verschillen in polariteit.
De TLC-plaat moet worden verwijderd voordat het oplosmiddel de bovenkant van de plaat bereikt. Gescheiden verbindingen zullen soms gekleurd zijn, maar voor de analyse is vaak verder werk nodig. Veel verbindingen zullen oplichten wanneer het TLC-plaatje onder een ultraviolette lamp wordt geplaatst. TLC-platen worden ook vaak ondergedompeld in vlekken (zoals anisaldehyde, kaliumpermanganaat of jodium) om een verbinding op de plaat te laten verschijnen.
Toepassing
TLC wordt gewoonlijk gebruikt door organische chemici om de voortgang van reacties te controleren. De aanwezigheid van uitgangsmateriaal en producten kan worden gecontroleerd met één enkele TLC-plaat.
Op basis van de resultaten van een TLC-experiment kan een groter volume mengsel worden gescheiden door een andere techniek (zoals kolomchromatografie) met een soortgelijk oplosmiddelsysteem. Of een TLC-experiment kan worden herhaald met een ander oplosmiddel. Ook kunnen mengsels van oplosmiddelen worden gebruikt. Het gebruik van verschillende oplosmiddelen beïnvloedt de scheiding van de afzonderlijke componenten op de TLC-plaat.
