Tseetseevissen hebben een ongewone levenscyclus. Vrouwelijke tseetseevissen bevruchten slechts één ei tegelijk en houden elk ei in hun baarmoeder terwijl de nakomelingen zich intern ontwikkelen tijdens de eerste larvale stadia. Gedurende deze tijd voedt het vrouwtje de zich ontwikkelende nakomeling met een melkachtige substantie die wordt afgescheiden door een gemodificeerde klier in de baarmoeder.
In het derde larvenstadium verlaat de tseetseevlieg uiteindelijk de baarmoeder en kruipt in de grond. Daar vormt hij een hard omhulsel en wordt de pop. Ze voltooit haar metamorfose tot een volwassen vlieg. Dit duurt twintig tot dertig dagen, terwijl de larve afhankelijk is van opgeslagen hulpbronnen.
Normaal voeden insectenlarven zich voordat zij zich verpoppen, maar de ontwikkeling van de tseetseevlieg (voordat hij als een volgroeide volwassene te voorschijn komt) gebeurt zonder dat hij zich voedt. De ontwikkeling berust alleen op voedingsbronnen die door de vrouwelijke ouder worden geleverd, waaruit blijkt dat bloed een rijke bron van voeding is. Het vrouwtje moet voldoende energie krijgen voor haar eigen behoeften, voor de behoeften van haar zich ontwikkelende nakomelingen, en om de hulpbronnen op te slaan die haar nakomelingen nodig zullen hebben totdat zij als volwassene te voorschijn komen.