Schepping
In maart 1863, na de Emancipatie Proclamatie, gaf gouverneur John A. Andrew van Massachusetts zijn goedkeuring voor de oprichting van het 54ste Riegiment. Het regiment werd gecommandeerd (geleid) door kolonel Robert Gould Shaw.
Oorlogsminister Edwin M. Stanton had besloten dat blanke officieren de leiding zouden krijgen over alle "gekleurde" eenheden. Andrew koos Robert Gould Shaw als kolonel van het regiment, en Norwood Penrose "Pen" Hallowell als luitenant-kolonel. Veel van de andere officieren die het 54e regiment onder hun hoede hadden, kwamen uit abolitionistische families. Gouverneur Andrew koos er zelf een aantal uit.
Blanke abolitionisten (waaronder Shaw's ouders) rekruteerden de soldaten voor de eenheid.
Opleiding
Het 54ste trainde in Camp Meigs in Readville bij Boston. Tijdens de training kreeg de eenheid veel steun van abolitionisten in Massachusetts, waaronder Ralph Waldo Emerson. Donateurs doneerden ook zaken als warme kleding, gevechtsvlaggen en $500 om een regimentsband op te zetten en te trainen.
Al snel meldden zich meer mensen aan voor het 54e dan het regiment nodig had. Daarom was het medisch examen dat de vrijwilligers moesten afleggen om bij het 54ste te worden toegelaten, zeer grondig. Dit betekende dat degenen die werden aangenomen bij het 54ste zeer sterk en gezond waren. De generaal chirurgie van Massachusetts zei over het 54e: "Een meer robuuste, sterke en gezonde groep mannen werd nooit opgeroepen voor de dienst van de Verenigde Staten."
Op 23 december 1862 vaardigde Jefferson Davis, de president van de Geconfedereerde Staten van Amerika, een bevel uit. Dit bevel bepaalde dat als Afro-Amerikaanse soldaten of hun blanke officieren gevangen werden genomen terwijl zij vochten voor de Unie, zij ter dood zouden worden gebracht. In januari 1863 maakte het congres van de confederatie dit bevel tot wet. Deze Confederatie-wet bepaalde dat zowel Afro-Amerikaanse soldaten als hun blanke officieren, indien gevangen genomen, zouden worden overgedragen aan de staten waar de Afro-Amerikaanse soldaten slaven waren geweest.
De strijd ingaan
Desondanks verliet het 54ste Boston met een hoog moreel (ze voelden zich goed over het dienen in het 54ste). Na hun opleiding begon het regiment op 13 mei 1863 officieel te dienen in het leger van de Verenigde Staten. Ze verlieten Boston op 28 mei, met veel supporters die hen toejuichten. Toen ze in Beaufort, South Carolina, aankwamen, werden ze door plaatselijke zwarten en noordelijke abolitionisten begroet en hun aankomst gevierd.
In Beaufort sloot het 54e zich aan bij het 2e South Carolina Volunteers, een eenheid van ex-slaven uit South Carolina onder leiding van James Montgomery. Montgomery leidde beide eenheden in een overval op het stadje Darien, Georgia. De mensen die in het stadje woonden waren weggelopen. Montgomery beval de soldaten het lege stadje te plunderen en in brand te steken. Shaw verzette zich hiertegen en diende een officiële klacht in over het bevel aan zijn soldaten om te plunderen en te plunderen.